NGHIÊN CỨU THIẾT LẬP ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐƠN NHÂN MÁU NGOẠI VI TỪ CHÓ (Canis lupus familiaris) PHỤC VỤ MÔ HÌNH MIỄN DỊCH VÀ SÀNG LỌC in vitro

Tóm tắt

Nghiên cứu này được thực hiện nhằm nghiên cứu điều kiện nuôi cấy tế bào đơn nhân máu ngoại vi (Peripheral Blood Mononuclear Cells – PBMCs) từ chó (Canis lupus familiaris) để ứng dụng trong các mô hình miễn dịch và thử nghiệm in vitro. PBMCs được phân lập từ máu toàn phần bằng phương pháp phân lớp Ficoll, sau đó nuôi cấy trong đĩa 96 giếng với hai loại môi trường (RPMI-1640 và DMEM) và ba nồng độ huyết thanh bò thai (FBS: 5, 10, 15%). Các chỉ tiêu gồm hình thái tế bào, mật độ, tỷ lệ sống của tế bào huyền phù, và khả năng sống của tế bào bám dính (phép thử MTT) được đánh giá tại các mốc thời gian 1, 3, 6 và 9 ngày. Kết quả cho thấy môi trường RPMI-1640 duy trì mật độ tế bào huyền phù cao hơn, đặc biệt vào ngày thứ 6 (2,733 ± 0,104 ×10⁵ tế bào/mL; p < 0,05), trong khi môi trường DMEM kết hợp với 10% FBS thúc đẩy tốt khả năng bám dính và duy trì mức OD MTT cao hơn, phản ánh sự hiện diện của nhiều tế bào sống có hoạt động enzyme chuyển hóa nội bào tích cực. Tỷ lệ sống và OD MTT trong nhóm 10% FBS không khác biệt có ý nghĩa so với 15% FBS, cho thấy đây là nồng độ phù hợp cho các ứng dụng nuôi cấy.